被毒蛇咬了的真實(shí)場景
設(shè)想這么一個(gè)場景，當(dāng)你被蛇咬了，該怎么辦？
夜晚時(shí)分你在散步時(shí)，突遇毒蛇偷襲，傷口見血，Oh~NO!
生死關(guān)頭，你冷靜下來，慶幸還好看了《泰囧》，迅速吸出毒液、結(jié)扎傷口上端、燒灼傷口……
（圖片來自網(wǎng)絡(luò)）
當(dāng)你爭分奪秒趕到醫(yī)院滿懷希望時(shí)，等來的卻是“我們沒有相應(yīng)的診斷和治療條件” Oh~NO!
醫(yī)院連忙聯(lián)系蛇傷救治中心，通話那邊的醫(yī)生問“是被什么蛇咬的？長什么樣？”
Oh~NO! 你抱怨著被咬之后驚魂未定之時(shí)哪里還記得它長什么樣！知道是什么蛇！
“我們得確定毒蛇品種才能準(zhǔn)備相應(yīng)的血清，每種蛇只能使用相應(yīng)的血清，誤用血清的話不僅得不到有效治療，還會(huì)造成血清使用量增加，進(jìn)而引起嚴(yán)重副作用。”
“黑色的，有花紋……”你默默地說。
“花紋是什么樣的？什么顏色？條狀？橫紋？點(diǎn)狀？”
“形態(tài)特征是什么樣的？它是怎么爬行？它受驚時(shí)會(huì)怎么樣？它頭部什么樣？它的尾巴是長是短？是粗是細(xì)？”……
面對(duì)醫(yī)生的狂轟亂炸，你盡可能地回憶起每一個(gè)點(diǎn)滴，但很多的細(xì)節(jié)你從來沒有注意過，此刻你超級(jí)后悔被咬之后為什么沒有第一時(shí)間拍照錄像發(fā)朋友圈。
最終醫(yī)生根據(jù)治療經(jīng)驗(yàn)，再結(jié)合蛇的分布特點(diǎn)，大概確定了種屬。但面對(duì)著面前幾十種長得差不多的蛇，你再次陷入了絕望……
Oh~NO! 到底是哪種呢？該怎么辦？
蛇傷診斷治療的研究現(xiàn)狀
2017年，世界衛(wèi)生組織就將蛇傷列為全球應(yīng)當(dāng)協(xié)同起來優(yōu)先應(yīng)對(duì)的熱帶疾病。每年，全球被蛇咬傷人數(shù)在180萬-270萬人，其中超過12.5萬人死亡。我國每年被蛇咬傷人數(shù)達(dá)20-40萬人，致死人數(shù)近萬人。其中，被蛇咬傷的病人很多會(huì)由于治療不及時(shí)落下終身殘疾，造成嚴(yán)重的家庭負(fù)擔(dān)。
全球約有3596種蛇，其中有毒蛇類768種，包括眼鏡蛇科60個(gè)屬300種、蝰蛇科27個(gè)屬329種、以及游蛇科和鰻形蛇科中的一些有毒種類。蛇毒是由肽和蛋白質(zhì)組合的毒素混合物，包含四類主要蛋白家族，六類次要蛋白家族和至少36類稀有蛋白家族。這些毒素在屬內(nèi)相似度高，但在不同屬間卻差異很大。由于毒液成分異質(zhì)性，毒蛇種類的快速精準(zhǔn)判定成為蛇傷救治的關(guān)鍵所在。
然而和剛才的場景演示相似，傷者很難準(zhǔn)確描述毒蛇的外形和形態(tài)，甚至還有一些傷者都沒有發(fā)覺自己被蛇咬到，直到發(fā)現(xiàn)被咬部位腫脹才引起了注意。加上劇毒蛇與無毒蛇長相上十分相似。因此蛇傷診斷一直是臨床治療中的重點(diǎn)難點(diǎn)。
科學(xué)家們嘗試通過酶活性分析、遺傳學(xué)分析及免疫分析等方法鑒定蛇毒種類，
但這些方法不能做到種屬特異性。而開發(fā)屬特異性的診斷抗體和治療抗體不僅能快速鑒定毒蛇種類，還能做到針對(duì)性治療的效果，因此發(fā)展屬特異性抗血清和診斷方法逐漸成為蛇傷診斷和治療的新趨勢。
但是目前研發(fā)大多數(shù)的抗體都是多克隆抗體，存在著特異性差且在蛇毒高濃度情況下容易出現(xiàn)假陽性等問題。事實(shí)上，被同一種蛇咬傷的不同患者蛇毒含量差異能達(dá)到上百倍，并且病人血液中蛇毒含量極低（大約為1-100ng/ml），因此現(xiàn)有依賴多克隆抗體開發(fā)的檢測試劑盒很難滿足臨床需求。而已經(jīng)報(bào)道的抗蛇毒單克隆抗體也因?yàn)樘禺愋缘投荒苡糜谂R床診斷。目前為止幾乎沒有可靠的蛇傷診斷方法用于種/屬特異性鑒定。
全新的蛇傷診斷抗體制備策略
中科院昆明動(dòng)物研究所賴仞團(tuán)隊(duì)基于前期對(duì)蛇的毒液成分、毒理機(jī)制和蛇傷救治的研究，提出了一種全新的、高效的蛇傷診斷抗體研發(fā)策略，通過“抗原篩選-抗原表位的肽片段驗(yàn)證-抗體驗(yàn)證”三步法精準(zhǔn)快速地制備蛇傷特異性診斷抗體，能夠解決蛇傷診斷中現(xiàn)有的特異性低、檢測靈敏度低的難題。
首先通過多組學(xué)數(shù)據(jù)分析蛇毒成分，篩選屬特異的蛇毒蛋白質(zhì)和潛在抗原，獲得不同屬蛇毒中高含量蛋白序列。再對(duì)該蛋白質(zhì)氨基酸序列進(jìn)行免疫原性、特異性和空間可接近性分析。選取可用候選多肽抗原并用該多肽抗原制備多克隆抗體，并用該抗體驗(yàn)證候選多肽特異性和空間可及性。用包含有已經(jīng)驗(yàn)證多肽抗原的天然毒素蛋白質(zhì)制備多克隆抗體和單克隆抗體，其中在單克隆抗體制備中運(yùn)用已驗(yàn)證多肽篩選特異性抗體。將以上單/多抗體進(jìn)行配對(duì)和蛇毒樣品檢測。
運(yùn)用該策略該團(tuán)隊(duì)成功研發(fā)出了針對(duì)兩個(gè)近源屬（竹葉青屬和原矛頭蝮屬）的特異性診斷抗體，以該抗體開發(fā)的診斷試劑能在5-10分鐘內(nèi)就可以準(zhǔn)確判斷毒蛇種類。
圖中a、b分別為中國十大劇毒蛇的竹葉青和烙鐵頭
或許，在不久的將來，當(dāng)你不幸被蛇咬傷了，不必再自責(zé)記不清蛇長什么樣，也不必四處尋找蛇傷救治專家，可能蛇傷診斷試劑條已經(jīng)遍布祖國各地的鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院，在哪里你可以得到最快的診斷，最快的治療。
當(dāng)然，最好就是沒有假設(shè)，沒有被蛇咬傷……
